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背景和目的:睡眠剥夺能够发挥快速抗抑郁效应,但其神经生物学机制至今尚不明确。睡眠剥夺过程中可观察到胞外腺苷水平明显升高及其受体发生一系列的变化,这提示腺苷系统在抑郁症病理生理、睡眠剥夺快速抗抑郁效应的机制、疗效等方面有一定作用。另一方面,CREB(环磷酸腺苷反应元件结合蛋白)是抑郁症相关信号通路中的一个交汇点。因此,本研究通过对慢性应激抑郁模型大鼠进行72小时快眼动睡眠剥夺并结合应用腺苷受体拮抗剂,观察海马和前皮质脑区CREB表达及磷酸化水平的变化,探讨腺苷在睡眠剥夺快速抗抑郁机制中可能的作用方式。材料和方法:实验动物为成年雄性Sprague Dawley大鼠,随机分为正常对照组(n=9,以下称A组)、应激造模组(n=54)。应激造模组采用21天慢性轻度不可预见性应激(chronic mild unpredicted stress,CMUS)和分养两种经典模型结合的方式来建立抑郁模型,采用随机区组法把造模成功大鼠分为6组:抑郁模型组(B组)、睡眠剥夺组(C组)、水环境对照组(D组)、生理盐水对照组(E组)、腺苷A1受体拮抗剂组(F组)和腺苷A2a受体拮抗剂组(G组)、。利用小平台水环境法对抑郁模型大鼠进行快眼动睡眠剥夺,并用大平台水环境做对照,排除水环境的影响。采用自发活动测试和蔗糖水消耗实验观察大鼠抑郁行为的变化,Western-blot方法检测各组大鼠海马、前皮质CREB总蛋白及磷酸化水平的变化。结果:1.开场实验:大鼠经过21天CMUS后自发活动较正常对照组显著减少(P<0.01);C组大鼠经过72hREMSD后,自发活动与水环境对照组相比显著增加(P<0.01);F组大鼠经过72hREMSD后,自发活动无明显变化(P>0.05),与E组相比有显著差异(P<0.01);G组大鼠经过72hREMSD后,自发活动明显增加(P<0.01),而且与E组相比无统计学差异(P>0.05)。2.蔗糖水消耗试验:大鼠经过21天CMUS处理后蔗糖水消耗量和蔗糖水消耗百分比均比正常对照组显著减少(P<0.01)。3. CREB总蛋白(tCREB)及磷酸化水平(pCREB和pCREB/tCREB)的变化:1)各处理方式对抑郁模型大鼠前皮质tCREB没有影响(P>0.05)。经过21天CMUS,大鼠前皮质磷酸化水平较正常对照组显著减少(P<0.01);72hREMSD使C、E组大鼠前皮质pCREB水平升高(P<0.01);F、G组大鼠前皮质pCREB水平明显低于与E组(P<0.01)。2)各处理方式对抑郁模型大鼠海马tCREB没有影响(P>0.05)。经过21天CMUS,大鼠海马pCREB与正常对照组相比显著减少(P<0.01);72hREMSD使C、E组大鼠海马pCREB水平显著提高(P<0.05);F组大鼠前皮质pCREB水平显著低于生理盐水对照组(P<0.05);而G组在72hREMSD后大鼠海马pCREB明显高于B组(P<0.05),与E组相比差异没有统计学意义。结论:1. 21天CMUS可导致大鼠自发活动明显减少,72 h REMSD可快速逆转这种改变;在72 h REMSD过程中对大鼠注射腺苷A1受体拮抗剂可阻断REMSD在行为学上的效应,而在72 h REMSD过程中注射腺苷A2A受体拮抗剂,大鼠的自发活动仍可增加;2. 21天CMUS降低大鼠海马和前皮质pCREB水平,可能是慢性应激导致大鼠抑郁样行为的机制之一;3. 72hREMSD升高抑郁模型大鼠海马和前皮质pCREB水平,可能是REMSD抗抑郁效应的机制之一。4.腺苷A1受体被拮抗时可阻断REMSD升高抑郁模型大鼠海马和前皮质pCREB水平的效应;腺苷A2A受体被拮抗时,REMSD仍可引起海马pCREB水平的升高,提示腺苷A1受体可能通过调节细胞内CREB相关信号通路参与REMSD的抗抑郁作用。