【摘 要】
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目的:脑小血管病的发生率逐年升高,脑白质病变是其主要的病理特征。其中缺血性脑白质病变发病机制尚不明确,缺乏有效的治疗手段。MicroRNAs（miRNAs）是一类小的非编码RNA分子,具有外周血稳定可测及调控多个下游靶基因的优势,它在众多疾病中被证实参与疾病发生发展,是潜在的新型生物学标记和治疗靶点。但其在缺血性脑白质病变中的作用并不清楚。本研究拟构建缺血性脑白质损伤模型对胼胝体区域miRNAs表
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目的:脑小血管病的发生率逐年升高,脑白质病变是其主要的病理特征。其中缺血性脑白质病变发病机制尚不明确,缺乏有效的治疗手段。MicroRNAs（miRNAs）是一类小的非编码RNA分子,具有外周血稳定可测及调控多个下游靶基因的优势,它在众多疾病中被证实参与疾病发生发展,是潜在的新型生物学标记和治疗靶点。但其在缺血性脑白质病变中的作用并不清楚。本研究拟构建缺血性脑白质损伤模型对胼胝体区域miRNAs表达谱进行研究,旨在为缺血性脑白质病变治疗新靶点的研发提供理论依据。方法:采用置入微弹簧圈造成小鼠双侧颈总动脉狭窄构建缺血性脑白质病变模型,免疫荧光检测胼胝体区胶质细胞增生及髓鞘蛋白变化,卢卡斯快蓝病理染色观察脑白质神经纤维,行为学实验评估小鼠认知损伤程度。利用基因芯片技术检测胼胝体脑白质组织中的miRNAs表达谱,后续对差异表达miRNAs进行生物信息学GO和Pathway富集分析,最后采用定量PCR技术对差异表达miRNAs进行验证。结果:双侧颈总动脉狭窄模型组与假手术组相比,认知行为评估显示空间记忆和识别记忆能力明显下降,且胼胝体区域胶质细胞增生显著,脑白质神经纤维稀疏可见空泡,提示缺血性脑白质损伤模型建模成功。基因芯片检测发现两组间的胼胝体脑白质差异表达miRNAs有16个,其中10个miRNAs表达上调,6个miRNAs表达下调。生物信息学分析发现差异miRNAs主要累及调控转录,蛋白结合,核细胞连接等相关途径参与缺血性脑白质损伤的病理过程。进一步定量PCR验证发现miRNA-218-5p的表达变化与基因芯片结果一致。根据靶基因预测,PLXNC1很有可能是miR-218-5p在BCAS小鼠模型中调控缺血性脑白质损伤的靶基因。结论:双侧颈总动脉狭窄小鼠胼胝体组织中存在多种差异表达miRNAs如miR-218-5p,后续功能研究有助于揭示缺血性脑白质病变的病生机制及提供候选治疗新靶点。
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