均匀设计在枇杷ISSR-PCR反应体系优化中的应用

来源 :基因组学与应用生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nilaomei
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本实验通过U255(5^4)均匀设计实验研究,对枇杷ISSR—PCR分子标记体系中模板DNA、dNTPs、TaqDNA聚合酶、Mg^2+、引物5个组分的浓度进行优化。获得25μL反应体系中各成分的适宜浓度或用量分别是:模板DNA为10ng、dNTPs为0.5mmol/L、TaqDNA聚合酶为1U、Mg^2+为2.5mmol/L,引物为0.4μmol/L。与单因素梯度优化体系相比,操作简便,简化了实验步骤,获得的实验结果可靠,从100条ISSR引物中筛选出27条扩增良好的引物,并获得了这些引物的最佳退火温度
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