目的:内皮细胞功能障碍参与了动脉粥样硬化发生的起始,而动脉粥样硬化是心血管疾病的病理基础。本实验室已有的研究表明,鞘磷脂合酶2（SMS2）可通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进内皮细胞功能障碍,同时,内质网应激可导致内皮细胞功能障碍,但SMS2和内质网应激之间是否存在关联尚不清楚。为了探究它们间的相关性及可能的分子机制,本论文构建了SMS2过表达人脐静脉内皮细胞（HUVECs）模型,并同时分别使用4-苯基丁酸（4-PBA）、辛伐他汀（Simvastatin）、氯化锂（LiCl）和沙利霉素（Salinomycin）处理细胞,并检测相关的分子指标及生物学行为。方法:1.为探究SMS2和内质网应激间的可能关系将HUVECs细胞进行三种不同的处理:（1）为探究SMS2和内质网应激间的关系将HUVECs分为C（阴性对照组）和S（SMS2高表达组）两组;（2）为探究内质网应激和SMS2间的关系将HVUECs细胞分为Control和Tunicamycin（内质网应激激活剂）两组;（3）为确认SMS2可导致内质网应激,而非蛋白过载所致内质网应激将HUVECs分为C和Dy105（SMS2抑制剂）两组。按照上述不同分组分别构建相应的细胞模型,并利用WB技术检测GRP78和SMS2的表达,TLC技术检测SMS酶活。2.为探究Wnt/β-catenin信号通路和内质网应激间的可能关系将HUVECs分别分为C、Li（LiCl,氯化锂,激活Wnt/β-catenin信号通路）和Sal（Salinomycin,沙利霉素,抑制Wnt/β-catenin信号通路）三组;而为了探究SMS2激活Wnt/β-catenin信号通路的可能机制将HUVECs细胞分为C和S两组。并利用WB技术检测内质网应激相关分子、β-catenin、P-β-catenin、LRP6和P-LRP6的表达。3.为探究内质网应激和内皮细胞功能障碍间的可能关系,将HUVECs分为C、S、4-PBA（抑制内质网应激）和S+4-PBA四组,WB检测相关分子的表达和细胞粘附实验检测内皮细胞功能障碍相关指标。4.为探究胞内胆固醇和内皮细胞功能障碍间的关系,将HUVECs分为C、S、Sim（抑制胆固醇生物合成）和S+Sim组四组,非利平染色实验检测胆固醇含量,WB检测相关分子的表达,细胞粘附实验和试剂盒检测内皮细胞功能障碍相关指标。结果:1.SMS2过表达组相对于空白组GRP78和SMS2的蛋白表达水平都有显著增加,抑制SMS酶活后,GRP78的蛋白表达水平有显著降低,而利用Tunicamycin激活内质网应激则可显著增加SMS2的表达。2.相对于空白组,利用LiCl激活Wnt/β-catenin信号通路可使内质网应激相关基因GRP78、CHOP和ATF6及β-catenin蛋白水平升高,而Salinomycin抑制Wnt/β-catenin信号通路则获得相反实验结果;过表达SMS2可使β-catenin、P-LRP6和LRP6蛋白表达水平升高,但却降低P-β-catenin的含量。3.相对于空白组,SMS2过表达能促进内皮细胞功能障碍,内质网应激抑制剂4-PBA则减弱内皮细胞功能障碍,而联合处理后内皮细胞功能障碍相对于SMS2过表达组内皮细胞功能障碍明显减弱,但高于单4-PBA处理组。4.SMS2组相对于对照组,胞内胆固醇堆积明显增加,Simvastatin处理细胞后,相对于对照组细胞内胆固醇含量降低,内质网应激相关分子GRP78、CHOP和ATF6在蛋白表达水平的表达有显著降低;而相对于SMS2过表达组,SMS2高表达并同时Simvastatin处理可降低胆固醇含量,且内质网应激相关分子在蛋白水平的表达亦有降低。另外,相对于对照组,SMS2过表达内皮细胞功能障碍程度有明显增加,而SMS2高表达并同时Simvastatin处理后相对于SMS2过表达组内皮细胞功能障碍水平明显降低。结论:1.HUVECs高表达SMS2可以诱发内质网应激。2.SMS2可通过促进LRP6磷酸化修饰激活Wnt/β-catenin信号通路,而激活Wnt/β-catenin信号通路可导致内质网应激,并最终增强内皮细胞功能障碍。3.SMS2可导致细胞内胆固醇堆积,进而导致内质网应激并促进内皮细胞功能障碍。