前列腺炎(Prostatitis)是由于前列腺受到病原体如微生物等感染或由于某些非感染因素的刺激而产生的炎症反应[1]。前列腺炎患者临床通常表现为[2]:前列腺区域不适或疼痛、排尿异常、尿道分泌物异常等,是一种常见的疾病。根据发病过程及临床表现,可将前列腺炎分为急性前列腺炎、慢性前列腺炎。根据病原学不同,可将前列腺炎分为细菌性前列腺炎、非细菌性前列腺炎等[3]。目前,西医治疗前列腺炎的药物主要包括[4]:抗菌药物、α肾上腺素受体阻滞剂、植物药物以及中药、抗炎药物等。由于化学药物只能针对前列腺炎某一种症状治疗。效果较为单一,并且由于前列腺炎病征较多,需要药物能够多管齐下,方能取得较好疗效,因此化学药物在此方面还存在较多不足。清癃颗粒(暂定名,简称QL颗粒)处方是应用多年的临床经验方,由绵萆薢、菟丝子、马鞭草、莪术、五味子、牛膝等12味药组成,采用利水化湿、补益肝肾的主要治则,对慢性前列腺炎进行治疗。本文将建立大鼠急、慢性非细菌性前列腺炎模型,对QL颗粒的药效学进行研究。本文的研究包括三个部分:第一部分:QL颗粒对急、慢性前列腺炎模型大鼠的治疗作用研究。用角叉菜胶局部注射法致大鼠急性前列腺炎模型,通过对比假于术组、模型组以及不同剂量给药组大鼠前列腺液中白细胞数、卵磷脂小体数评价了 QL颗粒对急性前列腺炎模型大鼠的作用。用消痔灵局部注射法致大鼠慢性前列腺炎模型,通过对比假手术组、模型组以及不同剂量给药组大鼠前列腺液中白细胞数、卵磷脂小体数评价了 QL颗粒对慢性前列腺炎模型大鼠的作用;利用ELISA法检测大鼠前列腺匀浆中IL-8、IL-1β以及TNF-α评价QL颗粒对促炎性细胞因子的影响。利用病理组织切片方法,对大鼠前列腺组织进行评分,评价QL颗粒对慢性前列腺炎大鼠前列腺组织的影响。研究结果显示:1)角叉菜胶局部注射致大鼠急性前列腺炎模型造模并给药7d后处死动物,对急性前列腺炎模型大鼠的前列腺液中白细胞数及卵磷脂小体数进行检查。结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠前列腺液内白细胞数显著上升,前列腺液卵磷脂小体密度显著下降。QL颗粒可明显降低前列腺液内的白细胞数,明显升高前列腺液内的卵磷脂小体密度。2)消痔灵局部注射致大鼠慢性前列腺炎模型造模后,给药28d处死动物,对慢性前列腺炎模型大鼠的前列腺液中白细胞数进行计数检查。结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠前列腺液内白细胞数显著上升,QL颗粒可明显降低前列腺液内的白细胞数。对慢性前列腺炎模型大鼠的前列腺液中卵磷脂小体数进行推片计数检查结果表明,与假手术组相比,模型组大鼠前列腺液卵磷脂小体密度显著下降,QL颗粒可明显升高前列腺液内的卵磷脂小体密度。3)取慢性前列腺炎模型大鼠前列腺组织制匀浆,离心分离上清检测IL-8、IL-1β、TNF-α含量。与假手术组相比,模型组大鼠前列腺组织匀浆中细胞因子IL-8、IL-1β及TNF-α显著升高(p<0.05),QL颗粒各剂量均可明显降低前列腺组织匀浆 IL-8、IL-1β 及 TNF-α 表达(p<0.05)。4)模型组大鼠前列腺的出现明显的间质炎症,具体为血管扩张充血,有明显的炎细胞浸润(淋巴细胞和单核细胞),纤维组织增生伴不同程度的胶原化或玻璃样变。QL颗粒各剂量组均可改善上述炎症性表现。上述结果显示,QL颗粒能够有效缓解急、慢性前列腺炎模型大鼠的症状,降低前列腺组织促炎性细胞因子的含量,改善前列腺组织炎症症状,从而达到治疗目的。第二部分:QL颗粒辅助药理作用的研究给予大鼠负荷量生理盐水,筛选尿量达灌服量40%以上的大鼠进行利尿实验。单次给药或给QL颗粒7天,收集给药后1、2、3、4、5、24h尿液,计算前5小时尿液总量和24小时尿液总量,并测定单次给药后5h尿液中Na+、K+、Cl-含量,计算离子排泄量。研究结果显示:1)单次给药后,QL颗粒2.4g/kg剂量组可提高大鼠给药后2-5h尿量(p<0.05),0.8g/kg组可提高2-3h尿量。给药7天后,2.4g/kg组能提高正常大鼠给药后1-5h尿量及24h总尿量,0.8g/kg组可提高1-3h尿量。2)单次给药后,QL颗粒可增加尿Na+和K+的排泄量。上述结果显示,QL颗粒对正常大鼠具有一定的利尿作用。用二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型以及大鼠棉球肉芽肿模型评价QL颗粒的抗炎作用。用醋酸致小鼠扭体反应模型以及机械压力致小鼠疼痛反应模型评价QL颗粒的镇痛作用。研究结果显示:1)QL颗粒0.39g/kg、1.16g/kg、3.48g/kg能显著降低二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型的小鼠耳厚差(p<0.01),减少耳肿胀度(p<0.01,p<0.05),肿胀抑制率分别为31.5%,34.0%和52.5%;2)QL颗粒0.27g/kg、0.80g/kg、2.40g/kg均可显著抑制大鼠棉球肉芽肿模型的棉球肉芽质量(p<0.01)。抑制率分别为30.22%,44.66%和48.76%。提示QL能抑制棉球所致肉芽组织的增生,对慢性炎症具有良好的抑制作用。3)QL颗粒0.39g/kg、1.16g/kg、3.48g/kg剂量组均能延长小鼠扭体潜伏期(p<0.01,p<0.05),减少小鼠扭体次数(p<0.01),扭体抑制率分别为62.2%,67.1%和70.1%,提示QL颗粒对醋酸所致小鼠疼痛具有明显的镇痛作用。4)QL1.16g/kg及3.48g/kg剂量组给药2小时可明显提高小鼠对机械压力所致疼痛的阈值(p<0.05),提示QL颗粒能够提高小鼠对疼痛的耐受力。上述研究结果表明,QL颗粒具有良好的抗炎镇痛作用。第三部分:QL颗粒对巨噬细胞释放炎性细胞因子的影响利用LPS刺激小鼠巨噬细胞系Raw264.7分泌TNF-α、IL-6、IL-1 β及NO,加入QL颗粒含药血清或药物后,ELISA试剂盒检测细胞上清中上述细胞因子含量。研究结果显示:1)QL颗粒及其含药血清能够显著减少由LPS刺激引起的Raw264.7细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量(p<0.05)2)QL颗粒及其含药血清能够降低由LPS刺激引起的Raw264.7细胞上清中NO,IL-10含量升高。上述研究结果表明,QL颗粒对慢性前列腺炎的治疗作用可能与抑制促炎性细胞因子的分泌有关。