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卵磷脂是磷脂中起重要营养保健作用的主要成分,具有非常重要的生物学活性。在医学上有很高的医用价值,能预防和治疗高血脂、高胆固醇、脂肪肝,在保护细胞膜、抗氧化、抗衰老等方面起着重要作用。另外,在化工、轻工、食品工业等方面应用很广。本文以蛋黄粉为原料,深入探索高含量PC的提取纯化方法,主要研究了超声波-酶法、超临界CO2法、硅胶柱层析法等,为中试生产提供理论依据;关于检测方法,主要研究了HPLC法、TLC法测定PC和红外光谱分析,具有非常重要的经济价值和理论意义。主要研究内容及所得结果如下:1.采用超声波-酶法提取PC。先用乙醇加酶以及超声波处理的条件下,除去原料中的脂肪酸和部分杂质,得到淡黄色粉术状磷脂,在45℃下提取2-3次为宜;以分光光度法测定的磷含量为评价指标,通过正交优化试验条件,考察了蛋白酶添加量、超声时间、乙醇浓度和料液比四因素对提取的影响,结果发现蛋白酶添加量对提取得率有显著影响,最佳工艺条件为:酶添加量20ml,90%乙醇,料液比1:7,在45℃热水浴中提取70min,其最高产品提取率为90.787%。2.采用超临界CO2法提取PC。以蛋黄粉作原料,采用超临界CO2法进行提取,可以提取出蛋黄油,通过对各影响因素的进一步考察,得到分离蛋黄油的最佳工艺参数为:萃取压力30 MPa,萃取温度50℃,萃取时间150min,萃取流量20L/h,其最高产品提取率为98.5%。3.采用硅胶柱层析法纯化PC。对洗脱剂、洗脱方式、加样量和流速进行了研究。经过研究确定加样量2.5%,保持3ml/min的流速,以酸性氯仿.甲醇混合体系进行梯度沈脱,收集含有单一PC的馏分,经浓缩干燥,最终得到微黄色的卵磷脂产品,通过高效液相色谱分析,纯度为91.05%。4.HPLC法测定PC含量。色谱条件为:色谱柱Hypersil(5μm,250mm×4.6mm):流动相为乙睛:甲醇:水=65:21:14;检测波长为205nm,进样量为10μl;流速为1.8mL/min,方法快速,准确,重现性和稳定性结果满意,RSD在2%以下。对于所制得的蛋黄卵磷脂精制进行高效液相色谱的方法定量测定,定量分析纯化后PC纯度为91.05%。粗品PC纯度为83.15%。5.对柱纯化样,采用了薄层层析和远红外色谱分析,证实样品为卵磷脂,最终的产品有很高的纯度。