背景牙本质树脂粘结技术的持续进步让树脂美学修复得到了快速的发展,然而,牙本质树脂粘结由于部分胶原纤维的暴露和金属基质蛋白酶等的降解造成的粘结持久性下降仍然困扰着广大医生和患者。近来持续升温的牙本质胶原纤维仿生再矿化技术为解决牙本质树脂粘结问题提供了新的思路。纳米级的羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)以其良好的生物性能而广泛应用于骨组织和牙釉质缺损的修复,但是其在牙本质胶原纤维上的矿化研究仍未获得明显进展。纳米级无定形磷酸钙(amorphous calcium phosphate, ACP)凭借其独特的流动性优势可以在牙本质胶原纤维内和纤维外形成矿物,从而可以弥补混合层树脂无法进入的缺陷。然而,纳米级无定形磷酸钙仍处于概念验证阶段,过长的矿化时间阻碍了其进一步的临床应用。因此,纳米级羟基磷灰石在牙本质树脂粘结的应用,以及纳米级无定形磷酸钙如何缩短矿化时间,都将是探索解决牙本质树脂粘结缺陷的可能途径之一。目的本实验拟应用纳米级羟基磷灰石处理粘结前脱矿牙本质,和纳米级无定形磷酸钙矿化液短时再矿化脱矿牙本质,探讨两者对于牙本质树脂粘结的力学性能的影响以及评估其在混合层中的矿化效果。方法1.借鉴Cai等合成不同尺寸大小羟基磷酸钙的方法制备20nmHAP颗粒,将样品采用X射线衍射仪对样品进行晶体结构测试。以聚丙烯酸作为稳定剂制备nano-ACP溶液。选取20颗三个月内拔除的健康无龋坏无变色的第三磨牙,在水冷却下用慢速切割机垂直于牙长轴方向于髓室角上方1mm冠向切除牙釉质并抛光,随机分成四组,以格鲁玛酸蚀15秒,大量水冲洗10秒,分别(1)轻吹干保持牙面湿润；(2)轻吹干并涂布纯酒精三次,保持牙本质面酒精湿润；(3)轻吹干并涂布0.22g/1HAP酒精溶液三次；(4)将样本浸入含有STMP的ACP溶液中一周,取出冲洗10秒；全部样本用single bond进行标准粘结,形成6mm的树脂冠,储存于37℃去离子水中24小时。2.采用盲法对各牙编号,切取粘结面为1mm2的样本,分别进行微拉伸粘结强度测试,记录样本断裂时的峰值,揭盲并计算微拉伸强度(MPa)。3.制备直径为3mmm2的树脂-混合层-牙本质粘结界面,干燥,环氧树脂包埋,用超薄切片机切取70nm超薄切片,进行透射电镜观察粘结界面。结果1.将制备的nano-HAP进行XRD衍射得到图谱与JCPDS标准卡值进行对比,样品的衍射特征峰值分布与羟基磷灰石晶体分布一致,表明制备得到的产物为羟基磷灰石晶体。2.微拉伸力学测试结果显示牙本质酸蚀后用single bond plus标准的湿粘结方法得到的粘结强度最小(20.80±2.97MPa),牙本质酸蚀后浸泡nao-ACP溶液一周的样本粘结强度最大(27.14±4.41MPa)。所有数据符合正态分布且方差具有齐次性。牙本质酸蚀后经nano-HAP、nano-ACP1周处理后,牙本质树脂粘结强度相较于标准的湿粘结有较大的提高,具有统计学意义(P<0.05)。nano-HAP处理与单纯酒精处理粘结强度具有差异性(P<0.05),而nano-HAP处理和nano-ACP1周两者之间的粘结强度无显著性明显差异(P>0.05)3.透射电镜观察脱矿胶原纤维再矿化结果显示,标准湿粘结和酒精对照组混合层中未见矿物沉积,nanp-HAP处理组可见混合层中有团聚的HAP颗粒,而nano-ACP处理混合层全层可见大量磷灰石晶体分布,纤维内和纤维外均有矿物形成。结论Nano-HAP和nano-ACP溶液对牙本质粘结前处理均可以增强牙本质树脂粘结的强度。但是,HAP颗粒无法有效的渗入胶原网架内,不能在混合层中形成有效的矿物沉积,因而需要进一步研究保持HAP颗粒稳定和分散的介质。Nano-ACP溶液处理1周可以显著增强牙本质树脂的粘结强度,可以渗入混合层中牙本质胶原网的底层,形成较为均匀的纤维内和纤维外矿物。