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近年来研究发现黏多糖类物质肝素(heparin)除具有抗凝血作用外,还能促进结合在内皮细胞(EC)表面的SOD的释放从而起到抑制氧自由基的作用,另外它在防治肺损伤方面也受到医学界的关注.因此,我们选择肝素对SOD进行结构修饰以制备肝素-SOD结合物(HEP-SOD),并研究其生物学性质及对辐射损伤的防治作用.HEP-SOD的制备采用了两种方法.第一种方法采用12%高碘酸钠溶液4℃活化肝素20h,活化的肝素溶液与SOD在pH9.5、0.3moL/L碳酸盐缓冲液中进行修饰反应12h,经DEAE-FF凝胶柱(2.5cm×50cm)层析制备出修饰的SOD,命名为HEP<,IO4><->-SOD;第二种方法是将氰尿酰氯溶于水与丙酮(1:2)的混合液中使呈饱和溶液,1 0min内滴加到肝素溶液中,浓碱调整保持pH8~9之间进行活化反应,得到的活化肝素溶液与SOD在0.1 mol/L、pH9.2的硼酸盐缓冲液中进行修饰反应12h,经DEAE-FF凝胶柱(2.5cm×50cm)层析分离出修饰的SOD,命名为HEPcc-SOD.对生物活性测定表明,两种方法制备的SOD修饰物(HEP<,IO4><->-SOD和HEP<,CC>-SOD)活性保持率基本相同;用TNBS法测定,两者自由氨基修饰率相当;聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳检测,两者的电泳图谱基本一致;稳定性试验表明,两种HEP-SOD的热稳定性明显优于未修饰SOD.酶联免疫法(ELISA)测定两种HEP-SOD抗原性表明,两种方法制备的HEP-SOD均基本不能诱发家兔产生抗其自身的抗体,对诱发家兔抗SOD抗体的能力均降低为未修饰SOD的1/4.研究了HEP<,IO4><->-SOD对辐射致DNA损伤的保护作用.在质粒pcDNA3溶液中加入相同活性单位的HEP<,IO4><->-SOD、SOD和肝素与SOD混合物,用120 Gy的<60>Coγ射线照射,用琼脂糖电泳检测,结果表明,各用药组质粒DNA的损伤程度均低于未加药组,其中,HEP<,IO4><->-SOD组的损伤程度最低,且随着HEP<,IO4><->-SOD浓度的增加对质粒DNA的保护作用明显增强.