【摘 要】
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本研究旨在利用经典方剂四逆散进行药物加减自拟中药复方制备“胃溃康”颗粒,筛选颗粒剂的制备方法,进行质量初探,利用小鼠制备胃溃疡模型,观察颗粒剂对小鼠胃溃疡的作用。实验选取质量较好的柴胡、枸杞、大枣、枳实、炙甘草生药,合并提取后备用。在实验过程中需要对工艺条件进行筛选,因此用到了L9（3~4）正交试验,结果显示,提取工艺的最优设计为:加水量为生药重量体体积比7倍,煎煮两次,每次煎煮1h。最佳颗粒制备
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本研究旨在利用经典方剂四逆散进行药物加减自拟中药复方制备“胃溃康”颗粒,筛选颗粒剂的制备方法,进行质量初探,利用小鼠制备胃溃疡模型,观察颗粒剂对小鼠胃溃疡的作用。实验选取质量较好的柴胡、枸杞、大枣、枳实、炙甘草生药,合并提取后备用。在实验过程中需要对工艺条件进行筛选,因此用到了L9（3~4）正交试验,结果显示,提取工艺的最优设计为:加水量为生药重量体体积比7倍,煎煮两次,每次煎煮1h。最佳颗粒制备工艺:以糊精、乳糖、淀粉混合辅料,稠膏与辅料重量比1:2。以外观、粒度、水分、溶化性和TLC等项目作为指标考察颗粒剂的质量。利用HPLC测定颗粒剂柴胡皂甙A含量,色谱条件为:色谱柱为ZORBAX Edipse XDB-C18柱（150mm×4.6mm,5μm）;流动相为甲醇:水（70:30V/V）;检测器为紫外检测器,检测波长为210nm;流速1.0m L/min;柱温:30℃。在色谱条件绘制柴胡皂甙A标准品药物浓度-峰面积曲线,在此过程中对实验方法的精密度、重现性、加样回收率进行试验,随后对颗粒剂中含的柴胡皂甙A含量进行测定。结果显示,颗粒剂产品表现棕黄色,粒度、水分和溶化性检查合格,颗粒剂中含有柴胡皂甙A已经通过TLC手段证实;柴胡皂苷A标准品和颗粒剂样品的保留时间均为8.3 min左右,回归方程为Y=12987x+846253,r=0.99996。结果表明柴胡皂甙A在40-400μg/m L的范围内与峰面积呈良好的线性关系;精密度实验显示,柴胡皂甙对照品峰面积积分值相对标准偏差为0.16%;重现性结果显示,柴胡皂甙A对照品相对标准偏差为1.99%;柴胡皂甙A对照品加样回收率达到99.96±0.83,相对标准偏差为0.96%;6批颗粒剂柴胡皂甙A最低含量为0.29±0.11 mg/g。试验选取健康SPF雄性昆明小鼠60只,体重18-22g。随机分为六组,每组10只,分别为A组（“胃溃康”颗粒高浓度组）、B组（“胃溃康”颗粒中浓度组）、C组（“胃溃康”颗粒低浓度组）、D组（雷尼替丁,阳性对照组）、E组（生理盐水,模型对照组）、F组（生理盐水,空白对照组）。采用束缚水浸法造成小鼠应激胃溃疡模型,进行胃液p H、胃蛋白酶活性测定,胃组织匀浆MPO、IL-1β测定,胃溃疡面积比测定及病理组织观察。采用photoshop6.0软件统计胃溃疡面积积分,spss17.0软件对统计的结果进行分析。结果显示,小鼠胃溃疡模型成功;“胃溃康”颗粒中、高剂量组与空白对照组及雷尼替丁组p H差异不显著（P＞0.05）;高剂量组与空白对照组及雷尼替丁组胃蛋白酶差异不显著（P＞0.05）;与模型组比较,高、中、低剂量组MPO含量均下降,高剂量组差异显著（P＜0.05）;与模型组相比较,高、中、低剂量组,IL-1β含量均下降,高、中剂量组差异显著（P＜0.05）;胃组织形态观察显示,“胃溃康”颗粒高剂量组小鼠胃血痕较少,红肿情况较轻,与雷尼替丁组相似;与雷尼替丁组相比较,高剂量组溃疡面积比差异不显著（P＞0.05）;切片显示,“胃溃康”颗粒高剂量组胃组织细胞边缘有脱落,内部破坏程度较轻,与雷尼替丁相似。以上结果表明,“胃溃康”质量符合标准,实验所建立的HPLC条件可行;对“胃溃康”药效研究表明可有效改善胃溃疡所致p H降低现象,能有效抑制胃蛋白酶活性,降低MPO值,降低IL-1β值,减少胃溃疡面积,保护胃黏膜细胞。
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