【摘 要】
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目的:吉非替尼(Gefitinib,ZD1839,商品名:Iressa,易瑞沙)为可逆性小分子酪氨酸激酶抑制剂,可竞争细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)催化区域上Mg-ATP结合位点,阻断EGF
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目的:吉非替尼(Gefitinib,ZD1839,商品名:Iressa,易瑞沙)为可逆性小分子酪氨酸激酶抑制剂,可竞争细胞表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)催化区域上Mg-ATP结合位点,阻断EGFR信号传导至细胞内,从而抑制细胞的异常增殖、分化、抗凋亡、侵袭和转移、血管的生成等,起到抗肿瘤作用。临床前及临床试验显示其对多种实体瘤有效,如非小细胞肺癌(NSCLC)、结肠癌、乳腺癌等。临床上用于化疗失败的或不适于化疗的局部晚期或远处转移的NSCLC。然而临床数据显示只有部分患者对吉非替尼有反应:东方人NSCLC有效率多在25-35%,西方人有效率仅在8-15%;并且即使初始有效的患者经一段缓解期后部分病人可出现疾病进展,即出现获得性耐药。本试验建立吉非替尼耐药的人结肠癌耐药细胞系HT-29/Gefitinib模型,并初步研究其耐药机制。材料与方法:本实验采用逐步增加培养基中吉非替尼浓度,从人结肠癌细胞系HT-29中建立对吉非替尼耐药的细胞系HT-29/Gefitinib。采用MTT法,计算HT-29和HT-29/Gefitinib的半数抑制浓度(IC50)及耐药指数(RI);细胞计数法描绘耐药细胞和亲代细胞的生长曲线和群体倍增时间;流式细胞术对细胞周期分布的变化进行分析; MTT法检测HT-29/Gefitinib对5-Fu、DDP、L-OHP、CPT-11抗肿瘤药物的交叉耐药谱。免疫细胞化学方法检测比较两种细胞系中IGF-1Ra和P-IGF-1R、P-gp糖蛋白的分布表达,进一步研究获得性耐药的机制。结果:建立了吉非替尼耐药的人结肠癌细胞系HT-29/gefitinib,HT-29/gefitinib和HT-29 IC50分别为0.48umol/ml和0.018umol/ml,耐药
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