合适的动物模型对于人类疾病研究和药物开发至关重要。灵长类动物与人类高度相似,可以较好地模拟人类疾病的发生和发展的过程,因此灵长类动物模型是生物医学研究中最理想的动物模型。精原干细胞是位于睾丸组织曲细精管基底膜的一类具有自我更新和分化潜能的成体干细胞,可以源源不断地产生精子。因此,利用食蟹猴精原干细胞作为基因操作的对象,有望成为生产基因编辑灵长类动物疾病模型的一条有效途径。因此本研究的目的:1)体内途径,体内注射增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体转染食蟹猴精原干细胞得到转基因的精子;2)体外途径,用EGFP慢病毒载体转染体外分离的精原干细胞,再将携带EGFP的精原干细胞注射到受体食蟹猴体内,获得携带EGFP的食蟹猴精子;3)建立和优化食蟹猴精子的无卵黄冷冻保存体系。结果显示:对体内途径获得的精子进行PCR检测及免疫组化的鉴定,成功得到了转基因的精子;对体外途径分离的精原干细胞能进行短暂的培养并成功将携带EGFP的精原干细胞注射到白消安造模的食蟹猴体内,但由于时间原因并未得到转基因的精子;添加浓度为0.1、1、10μg/m L的抗冻蛋白Ⅲ(AFPⅢ)到无卵黄冷冻液中,可以显著地提高精子的冷冻复苏存活率。当AFPⅢ浓度为0.1μg/m L时对精子的线粒体膜电位保护最好。本研究对精原干细胞的初步培养及基于精原干细胞制备基因编辑动物模型做了初步探讨,希望为精原干细胞方面的研究做出参考。