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目的检测卵巢肿瘤微环境中白介素8的表达水平,分析IL-8对间质细胞的作用及可能的信号通路；通过三维培养和动物实验观察IL-8对肿瘤的生长及恶性表型的作用,并探讨其可能机理。方法1、在卵巢癌组织中用免疫组化的方法检测间质中IL-8的表达水平；用ELISA的方法检测NOF和CAOF细胞中IL-8的表达水平；用RT-PCR的方法检测IL-8受体CXCR1/CXCR2的表达情况。2、用人重组IL-8细胞因子处理正常成纤维细胞后,通过p-半乳糖苷酶染色法观察其衰老情况；用蛋白免疫印迹的方法探讨IL-8对间质细胞作用的可能机理：分CAF cm (condition medium)组24、48、72小时,CAFcm+IgG组24、48、72小时,IL-8组24、48、72小时。3、在三维培养实验中根据加入培养基的不同分5组：空白对照组、IL-8处理组、CAOFcm组、CAFcm+IgG IL-8组、Senescence cm,观察克隆球的数量、大小和向周围侵袭的能力。4、用两株卵巢癌细胞HEY和SKOV3建立人卵巢癌移植瘤动物模型。每个细胞系(以HEY为例)分6组：HEY、HEY+NOF组、HEY+NOF(IL-处理)组、HEY+NOF(CAOF条件培养基处理)组、HEY+NOF(CAOF条件培养基加IL-8抗体处理)、HEY+CAOF组,观察动物移植瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线。结果1、卵巢癌间质组织中IL-8的表达明显高于卵巢正常间质组织中的表达；在癌相关成纤维细胞的条件培养基中IL-8分泌也较正常成纤维细胞中的明显增多,此外,癌相关成纤维细胞表面受体CXCR1/CXCR2的表达较正常成纤维细胞中的也明显增强。2、用人重组IL-8细胞因子处理正常成纤维细胞,间质细胞呈现明显的衰老迹象；进一步的机理研究显示：IL-8在肿瘤微环境中主要是通过主要蛋白p53/pp53/p16、p65/pp65来促进间质细胞的衰老。3.三维培养实验结果显示,IL-8处理组相较于空白对照组中形成的克隆球体积更大、数量更多,且肿瘤细胞的侵袭性更强；在CAOFcm处理组中,形成的克隆球体积最大、数量最多,且细胞侵袭力也最明显；在CAFcm+IgGIL-8组中,形成的克隆球体积较CAOFcm组的明显缩小,数量也明显减少,细胞侵袭性也明显减弱,但相较于空白对照组,形成的克隆数仍较多,且细胞侵袭力仍较强；Senescence cm组较空白对照组中形成的克隆球体积明显增大,数量明显增多,但作用效果不如CAOFcm组明显。4、动物实验中,肿瘤生长曲线结果显示：单纯肿瘤细胞组(作为对照组)裸鼠体表的肿瘤体积很小,明显小于其他各组(除了第2组)；第2组中,即肿瘤细胞+NOF组形成的肿瘤最小；第3组中,即肿瘤细胞+NOF(IL-8处理后)组肿瘤体积大于对照组；第4组中,即肿瘤细胞与NOF(CAOF条件培养基处理后)组形成的肿瘤也较大,明显大于对照组；第5组中,NOF(CAOF条件培养基加IL-8抗体处理后)的肿瘤体积小于第4组,但大于空白对照组；第6组中,即肿瘤细胞+CAOF组形成的肿瘤最大,与对照组相比存在明显差异。结论卵巢癌相关成纤维细胞分泌的IL-8较正常成纤维细胞中明显增多；IL-8能够促进成纤维细胞衰老,而衰老的成纤维细胞能够促进肿瘤的恶性表型转化；IL-8在体内和体外均能促进卵巢肿瘤的生长和侵袭。