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目的:卵巢癌是最致命的一种妇科癌症,患者五年生存率仅有30%。由于卵巢癌异质性高,病理学机制复杂,常规化疗药物仅能使部分患者的病情较好缓解,且停药后多数患者会经历复发,长期化疗可使癌细胞产生耐药性。因此,寻找新的卵巢癌治疗方法和策略尤为重要。PARP抑制剂是一种新型卵巢癌治疗靶向药物,可通过抑制卵巢癌细胞的DNA损伤修复发挥抗癌作用,且可与其他化疗药物联用产生更好的治疗效果。有研究表明,PTEN缺失的某些肿瘤对PARP抑制剂的敏感性更强,但其在卵巢癌中的作用尚不明确。本课题旨在研究PTEN抑制剂是否对卵巢癌有杀伤作用,以及PTEN抑制剂是否能增强PARP抑制剂对卵巢癌的杀伤作用。方法:首先,通过MTT实验和克隆形成实验检测PTEN抑制剂VO-OHpic和PARP抑制剂Olaparib对几种常见卵巢癌细胞系增殖的影响;采用流式细胞术和Western blot检测VO-OHpic对卵巢癌细胞周期凋亡的影响;采用免疫荧光、免疫组织化学和Western blot检测VO-OHpic是否诱导卵巢癌细胞DNA损伤。然后,将不同浓度的VO-OHpic和Olaparib共同作用于卵巢癌细胞系,通过MTT实验检测两种药物联合使用对细胞的协同杀伤作用。最后,利用卵巢癌小鼠模型,研究两种抑制剂对小鼠皮下移植瘤生长的影响,以及对肿瘤内DNA损伤标志蛋白γH2AX和53BP1表达的影响。结果:体外实验显示VO-OHpic和Olaparib对几种常见卵巢癌细胞系A2780、SKOV3、HO8910、OVCAR5、OVCAR8、ES2细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,选择对VO-OHpic最敏感的SKOV3细胞和最不敏感的ES2细胞进行后续研究。进一步研究发现,VO-OHpic可促进SKOV3和ES2细胞凋亡及细胞周期G2/M期阻滞。机制研究发现,VO-OHpic能诱导卵巢癌SKOV3和ES2细胞产生明显的DNA损伤,上调了DNA损伤相关蛋白γH2AX、53BP1、ATM和ATR的水平,抑制了PTEN蛋白的活性。选择对两种药物最不敏感的ES2细胞用不同浓度的VO-OHpic和Olaparib共同处理,结果显示联合用药比单一用药对细胞的杀伤效果更强,且两种药物具有协同杀伤作用。体内实验结果表明VO-OHpic和Olaparib联合使用可显著抑制小鼠皮下卵巢癌移植瘤的生长,并且上调了肿瘤组织内γH2AX和53BP1的蛋白水平。结论:体外和体内研究结果证明,PTEN抑制剂VO-OHpic对卵巢癌细胞具有一定的杀伤作用,可促进卵巢癌细胞的凋亡及细胞周期阻滞,并诱导卵巢癌细胞产生DNA损伤;PARP抑制剂Olaparib对卵巢癌细胞也具有杀伤作用;两种抑制剂联合使用对卵巢癌细胞具有协同杀伤作用。该研究为卵巢癌的治疗提供了新的思路,为卵巢癌治疗的临床用药提供新型的候选药物,也为小分子抑制剂药物联用的开发提供理论和技术支持。