目的:在肿瘤患者血清中发现的肿瘤特异性自身抗体已被认为是肿瘤早期诊断,预测复发风险和评估治疗反应的潜在的标志物。本研究旨在探讨血清O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）自身抗体作为胶质瘤诊断、预测复发风险及评估耐药的新型生物标志物的临床应用价值,并预测MGMT蛋白的B细胞线性表位。方法:1.对MGMT蛋白进行叠瓦式切割,构建MGMT多肽库,建立稳定的MGMT多肽微阵列检测方案。2.血清样本收集:本研究共纳入180例不同WHO病理级别的胶质瘤患者和311例健康志愿者血清样本。分别在3个时间点采集患者血清样本:术前、术后30天、胶质瘤复发时。3.采用多肽微阵列技术,检测术前胶质瘤患者和健康对照组患者血清中MGMT自身抗体的响应情况。4.以各条多肽在胶质瘤组与健康对照组中阳性反应率差异最大的SNR值为截断值,找出在胶质瘤组中高响应的多肽,并用高响应的MGMT自身抗体评估其作为诊断胶质瘤的效能。5.然后利用不同时间点采集的胶质瘤患者血清样本,研究MGMT自身抗体的变化规律。6.采用单因素和多因素分析方法,分析术前胶质瘤患者血清中MGMT自身抗体状态和水平与胶质瘤预测复发风险和耐药的相关性。7.利用生物信息学手段预测的B细胞表位系列与胶质瘤中高响应的多肽系列进行比对,预测高响应MGMT多肽自身抗体识别的B细胞线性表位位点,探讨其潜在的临床应用前景。结果:1.在胶质瘤患者血清中能够检测到MGMT多肽自身抗体,并鉴定出5条在胶质瘤组中高响应的MGMT多肽自身抗体（MGMT-02,MGMT-04,MGMT-07,MGMT-10,MGMT-18）。2.受试者工作曲线（ROC）分析表明,与单个MGMT多肽自身抗体诊断相比,5条多肽自身抗体的联合应用在胶质瘤与健康对照的鉴别中是最有效的,该联合诊断模型将曲线下面积增加到0.81（95%置信区间为0.69-0.87）,总体敏感性为75%,特异性为83%;在高级别胶质瘤组中更明显,曲线下面积为0.84（95%置信区间为0.78-0.90）,总体敏感性为75%,特异性为89%。3.术后第30天MGMT自身抗体水平下降,当肿瘤复发时,MGMT自身抗体水平升高并达到术前水平。4.单因素和多因素分析显示,仅仅术前血清MGMT-02多肽自身抗体状态和水平与无复发生存独立相关（p<0.05）,与胶质瘤WHO级别,年龄,性别,Ki-67表达无关（p>0.05）。术前血清阳性（SNR值5.5-20）患者较血清阴性患者复发时间短,与联合替莫唑胺放化疗耐药相关,血清MGMT-02多肽自身阳性（SNR值≥20）患者除外。术前监测MGMT-02肽自身抗体水平,对胶质瘤患者的识别、预测高危复发患者及替莫唑胺放化疗耐药有重要意义。5.将预测的B细胞表位序列与5条多肽的氨基酸序列进行比较,每条多肽有12个以上连续氨基酸序列相同。结论:在本回顾性研究中,我们提供了在胶质瘤血清中MGMT多肽自身抗体存在的证据,并在胶质瘤组中鉴定出5条高响应多肽。我们的研究表明,MGMT自身抗体可用于胶质瘤的诊断,预测复发风险和评估化疗耐药。我们确定的5条在胶质瘤病人高响应多肽,可能对开发新的单克隆抗体和针对MGMT不同表位的多肽癌疫苗有用。