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目的:研究脊髓Toll样受体4在重复使用恶唑酮引起的慢性瘙痒中的作用。 方法:本研究采用昆明小鼠,雄性,18~20g。按照2010年Yukihito等描述的方法,实验小鼠颈背部备皮,2d后开始实验。在小鼠颈背部备皮处一次性涂抹恶唑酮(10μl,0.5%,溶媒为丙酮)致敏,7d后(时间记为0 d,因此致敏当天记作-7d)开始激发,在第0、2、4、7、9、11d相同部位给予同等剂量恶唑酮进行激发。为研究恶唑酮的慢性致痒作用及其与脊髓TLR4表达变化之间的关系,小鼠随机分为3组(n=56):对照组(C组)、丙酮组(A组)和恶唑酮组(O组),分别涂抹NS、丙酮、恶唑酮。每组再随机分为-7、0、2、4、7、9、11d7个亚组。-7d亚组记录未涂抹致敏剂前30min瘙瘁行为学后处死小鼠取脊髓颈膨大,其余亚组记录激发后30min内的瘙痒行为学后,处死小鼠取脊髓颈膨大,用Western blot方法检测TLR4的表达。为研究腹腔注射TLR4抑制剂EGCG的止痒作用,小鼠随机分为丙酮+NS组(A+N组)、丙酮+EGCG20mg/kg组(A+E1组)、丙酮+EGCG40mg/kg组(A+E2组)、丙酮+EGCG60mg/kg组(A+E3组)、恶唑酮+NS组(O+N组)、恶唑酮+EGCG20mg/kg组(O+E1组)、恶唑酮+EGCG40mg/kg组(O+E2组)、恶唑酮+EGCG60mg/kg组(O+E3组),n=8。各组在第9d激发后8h开始腹腔注射EGCG或NS,1次/8h直到第11d激发前,共计6次,最后一次给药后30min激发,记录激发后30min瘙痒行为学后处死小鼠取脊髓颈膨大,用Western blot方法检测脊髓TLR4的表达。 结果:1.O组在激发第0、2、4、7、9、11d的搔抓行为多于C组和A组(P<0.01);O组小鼠脊髓TLR4表达随时间逐渐增加;0组小鼠搔抓行为与脊髓TLR4表达成正相关关系(r=0.947,P=0.000)。2.O+E1组与O+N比较搔抓行为无统计学差异;O+E2组和O+E3组搔抓行为无统计学差异;O+E2组和O+E3组搔抓行为较O+N组减少(P<0.05)但仍高于A+N组、A+E1组、A+E2组和A+E3组(P<0.05);O+E2组脊髓TLR4表达较O+N组减少(P<0.05)但仍高于A+N组和A+E2组(P<0.05)。 结论:脊髓TLR4可能参与重复使用恶唑酮引起的慢性瘙痒过程。