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II类乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)细菌素是一种热稳定性良好的小分子蛋白,可在人体消化道内被降解,因而对健康无害,对食品行业具有重要的意义。本研究以分离自酸马奶中的具有抑菌活性的Enterococcus faecium BZ2为研究对象,对其进行全基因组测序,并利用基因组学和生物信息学技术定位细菌素基因及进行异源表达。本研究将为开发新型天然食品防腐剂提供理论基础,并为进一步深入探究乳酸菌提供新思路。运用第二代高通量测序技术,采用DeNovo拼接方法对实验室前期从酸马奶中筛选到的具有抑菌功能的E.faecium BZ2进行全基因组测序,并对其序列进行生物信息学分析,确定了E.faecium BZ2基因组大小2,687,278 bp,GC含量38.1%,共得到2671个功能基因,总长度2,292,024 bp,平均长度858 bp,占基因组序列的85.29%,同时预测到9个基因岛、2个前噬菌体、2个潜在的CRISPR序列等其他基因元件。此外,还对II类细菌素进行基因注释,共筛选出5个细菌素相关领域中的38个候选基因,选取其中编码肠球菌素A和肠球菌素B的ent A和ent B基因作为目的基因进行蛋白表达验证。选取pET-28a为表达载体质粒,分别构建entA和entB基因的表达载体pET-ent A和pET-entB,首先,经诱导表达的优化成功表达出包涵体蛋白,其次,经变性、Ni-IDA柱纯化和复性、除盐和浓缩过程,得到高浓度的目的蛋白His-enterocin A和His-enterocin B,最后,以Listeria monocytogenes CMCC54002为指示菌,检测目的蛋白的生物活性,结果表明目的蛋白His-enterocin A和His-enterocin B对指示菌有抑菌活性,且二者以1:1联用时具有协同增效的作用。本研究确立了一条从基因挖掘到重组产物活性表达的研究通路,将为今后乳酸菌细菌素的异源表达和基因功能研究提供参考。