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目的:探究肝硬化脾亢脾组织中IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β细胞因子的表达及导致外周血细胞减少的原因与意义。方法:取55只雄性SD纯系大鼠随机的分成两组:对照组15只,用0.9 %生理盐水灌胃;实验组40只,用40% CCL4花生油溶液灌胃,每周2次,每次剂量为0.3 ml/kg,同时用15%酒精溶液作为两组大鼠的饮用水,共8周,建立肝硬化脾亢模型。检测肝功能和外周血细胞变化,HE和Masson染色观察大鼠肝、脾病理改变,确诊肝硬化脾亢模型后取脾脏组织,通过免疫组织化学、蛋白免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测两组大鼠脾组织中IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β的表达水平。两组数据用SPSS19.0统计学软件处理,数值型变量比较时用t检验,分类型变量比较时用χ2检验,P值小于0.05差异有统计学意义。结果:肝功能变化:实验组大鼠外周血肝功能ALT、AST和TBIL水平分别为 267.93 ±30.65 U/L、714.73 ± 143.56 U/L、23.49 ±6.36 μmol/L,均显著高于对照组(25.14±4.26U/L、123.86±18.60U/L、 1.43±0.38μmol/L),两组比较差异有统计学意义( t=-30.067, P<0.01;t=-15.661,P<0.01;t=4.631,P<0.01);TP 和 ALB (55.24± 5.15 g/L、24.94 ±2.94 g/L)均低于对照组(64.9 ±2.71 g/L、30.23 ± 1.51 g/L),差异有统计学意义(/ = 4.452, P < 0.01 ;/ = -13.389,P < 0.01 )。外周血细胞变化:实验组外周血WBC(25.67 ± 8.97×109/L)显著高于对照组(6.25±2.22×109/L),两组比较差异有统计学意义(t=-5.589,P<0.01); RBC、PLT(6.18 ±1.27×1012/L、432.47 ±127.81×109/L)均显著低于对照组(7.95 ±0.57×1012/L、1115.14± 148.09×109/L),差异有统计学意义(t=3.495,P<0.01;t=11.112, P<0.01)。免疫组织化学结果显示:实验组IFN-y、IL-4、IL-17和TGF-β阳性细胞表达率分别为46.67 %、56.67 %、36.67 %、73.33 %,明显高于对照组(13.33 %、6.67%、6.67%、13.33%),两组间比较差异有统计学意义(χ2=4.85, P<0.05; χ2= 10.42, P<0.01; χ2 = 4.60, P<0.05; χ2= 14.46, P<0.01)。蛋白免疫印迹结果显示:实验组大鼠脾组织中IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β相对表达强度(0.97 ± 0.48、1.76 ± 0.78、1.09 ± 0.39、1.51 ± 0.22)显著高于对照组(0.42±0.20、0.22 ±0.07、0.53 ± 0.25、0.63 ±0.17),差异有统计学意义(t = -3.779,P<0.01; t =-7.596,P<0.01; t =-3.227,P<0.01; t = -9.264, P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果显示:实验组IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β的mRNA相对表达水平分别为 2.98 ±0.11、3.00 ±0.33、2.81 ±0.70、2.91 ±0.63,显著高于对照组(1.00±0.03、0.96±0.10、1.06±0.21、0.99±0.052),两组间差异有统计学意义 (t= -41.70, P<0.01; t = -14.60, P<0.01; t= -5.96, P<0.01; t = -7.35,P <0.01)。Pearson 相关性分析:IFN-γ的 mRNA 与 IL-4、IL-17 及 TGF-β分别呈极强正相关 CR2=0.960, P<0.01; R2=0.833, P<0.01;R2=0.859, P<0.01);IL-4 mRNA的相对表达水平与IL-17及TGF-β分别呈强度正相关(R2=0.783,P< 0.01;R2= 788,P< 0.01); IL-17与TGF-β mRNA的相对表达水平呈强度正相关(R2=0.721,P <0.01)。IFN-y、IL-4、IL-17 及 TGF-β的蛋白相对表达强度与其mRNA相对表达水平分析显示,IFN-γ呈弱正相关(R2=0.421, P>0.05);IL-4、IL-17 和 TGF-β均呈强度正相关(R2=0.634, P < 0.05;R2= 0.572, P< 0.05;R2=0.766,P< 0.01)。IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β的蛋白相对表达强度与RBC、PLT分别呈负相关,但与WBC呈正相关。其中IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β均与 PLT呈强负相关(R2=-0.544,P<0.01; R2=-0.659,P<0.01;R2=-0.458, P<0.05;R2=-0.821, P< 0.01); TGF-β与 RBC、WBC 分别呈中等程度负相关、正相关(R2=-0.526, P<0.05;R2=0.636, P<0.01)。结论:肝硬化脾亢脾组织中IFN-γ、IL-4、IL-17及TGF-β细胞因子表达水平显著增高,且蛋白相对强度和mRNA相对表达水平呈正相关,IFN-γ、IL-4、IL-17及TGF-β与RBC、PLT分别呈负相关,与WBC呈正相关,这可能是导致外周血细胞减少的原因之一,为临床治疗和预后判断提供了一定的理论基础和指导作用。